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		植物中的蘆薈苷的提取活性成分的常用方法

　　聲明：本文分為上下2篇請(qǐng)您在看的時(shí)候?yàn)榱吮ＷC完整性可以在本篇文章的頁尾點(diǎn)擊下一篇文章：蘆薈的有效成分多樣復(fù)雜，而且很多化學(xué)成分的性質(zhì)是非常相近的，因此分離蘆薈中各種單體的技術(shù)還不成熟，現(xiàn)在應(yīng)用的蘆薈產(chǎn)品大多數(shù)是蘆薈提取的混合物，如果能制備性分離蘆薈中的有效成分，應(yīng)用于藥品和保健品中，特別對(duì)醫(yī)療行業(yè)將會(huì)是一個(gè)很有利的發(fā)展方向，因此，能夠建立一種提取分離蘆薈活性成分的方法和技術(shù)，在天然藥物研究中將會(huì)是一大進(jìn)步。由于提取分離純化蘆薈苷的技術(shù)的限制，在對(duì)蘆薈苷功能性質(zhì)方面的研究還比較缺乏，很多功效的研究都是基于對(duì)蒽醌類物質(zhì)總功效的研究，而蘆薈苷是蒽醌類物質(zhì)的代表，也是蘆薈蒽醌類物質(zhì)的主要成分，所以把功效歸功于蘆薈苷，要驗(yàn)證蘆薈苷的具體功效也需要對(duì)蘆薈苷進(jìn)一步分離純化。本課題的核心即是尋找到高速有效分離純化蘆薈苷的方法。

　　合物的提純得以大大簡(jiǎn)化。由于吸附性和篩選性原理，有機(jī)化合物根據(jù)吸附力的不同及分子量的大小，吸附在大孔吸附樹脂上的化學(xué)成分經(jīng)一定的溶劑洗脫而分開。大孔吸附樹脂孔徑、比表面積及構(gòu)成類型被分為許多型號(hào)，在應(yīng)用中，可根據(jù)實(shí)際要求及化合物特性加以選擇7。

　　蘆薈主要含蒽醌類和多糖類等活性成分，目前對(duì)于大孔吸附樹脂對(duì)蘆薈有效成分進(jìn)行富集純化的研究報(bào)道比較少，但其可行性已由張美玲論證8。而且實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明NKA-ⅡH和CAD45樹脂對(duì)蘆薈苷都有較好的吸附性能，對(duì)蘆薈有效成分的富集和純化是可行的，而且完全可以克服傳統(tǒng)加工方法存在的溶劑殘留、污染，產(chǎn)率低等問題，而且大孔吸附樹脂可以再生重復(fù)利用。但分離方法操作繁瑣，影響因素較多，分離純度較低，可考慮用于成分的粗分。

　　張美玲針對(duì)大孔吸附樹脂對(duì)蘆薈苷分離純度低的問題提出采用大孔樹脂對(duì)蘆薈苷進(jìn)行粗分離，后經(jīng)硅膠柱層析（TLC法定性檢測(cè)蘆薈苷流出的位置）進(jìn)一步純化得最終蘆薈苷成品，并用LC-GC或GC-MS聯(lián)用對(duì)種產(chǎn)品進(jìn)行定性分析。硅膠為極性吸附劑，吸附力的大小取決于被分離物質(zhì)的極性（極性越大，吸附力越強(qiáng)）和洗脫劑的極性（容劑極性越弱，硅膠對(duì)分離物質(zhì)的吸附能力越強(qiáng)）。因此，用硅膠吸附色譜分離一組極性不同的混合物時(shí)，極性大的物質(zhì)因吸附力大二洗脫慢；洗脫溶劑的極性增大，洗脫能力增強(qiáng)，洗脫速度加快。此法雖然能提高所得蘆薈苷的純度但操作更加繁瑣。

　　高速逆流色譜法：高速逆流色譜法(highspeedcountercurrentchromato-graphy,HSCCC)是一種高效快速的液-液分配色譜新技術(shù)。因其不使用載體,避免了有效成分被色譜載體的不可逆吸附,且分離純化同步完成,有機(jī)溶劑消耗少。欲用HSCCC進(jìn)行成功的分離,選擇適宜的溶劑系統(tǒng)非常重要。不同的溶劑系統(tǒng),具有不同的上、下相之比(比重輕者為上相,重者為下相),其黏度、極性、密度等性質(zhì)相差甚遠(yuǎn),對(duì)相同的成分具有不同的溶解、分配能力,形成分配系數(shù)的差異,對(duì)分離效果產(chǎn)生不同的影響。高速逆流色譜溶劑系統(tǒng)的選擇可以通過薄層層析的分配系數(shù)來確定。

　　高速逆流色譜法：高速逆流色譜法(highspeedcountercurrentchromato-graphy,HSCCC)是一種高效快速的液-液分配色譜新技術(shù)。因其不使用載體,避免了有效成分被色譜載體的不可逆吸附,且分離純化同步完成,有機(jī)溶劑消耗少，是分離科學(xué)技術(shù)的一個(gè)新分支。該技術(shù)是一種不用固態(tài)吸附劑的全液態(tài)的色譜方法。由于不使用固態(tài)支撐體,與其它的色譜技術(shù)相比,HSCCC能夠完全消除支撐體導(dǎo)致的樣品不可逆吸附和對(duì)樣品的沾染、失活、變性等影響,實(shí)現(xiàn)復(fù)雜混合物中各組分的高純度分離。而用HSCCC進(jìn)行成功的分離,選擇適宜的溶劑系統(tǒng)非常重要。不同的溶劑系統(tǒng),具有不同的上、下相之比(比重輕者為上相,重者為下相),其黏度、極性、密度等性質(zhì)相差甚遠(yuǎn),對(duì)相同的成分具有不同的溶解、分配能力,形成分配系數(shù)的差異,對(duì)分離效果產(chǎn)生不同的影響。高速逆流色譜溶劑系統(tǒng)的選擇可以通過薄層層析的分配系數(shù)來確定。

　　高速逆流色譜法的特點(diǎn)：1、應(yīng)用范圍廣，適應(yīng)性好。由于溶劑系統(tǒng)的組成及配比可以是無限多的，因而從理論上講HSCCC可以適用于任何極性范圍內(nèi)樣品的分離，在分離天然化合物方面具有其獨(dú)到之處。由于聚四氟乙烯管中的固定相為液體(不需要固相載體)，因而可以消除固一液色譜中由于使用固相載體而帶來的吸附損失，特別適用于分離極性物質(zhì)。2、操作簡(jiǎn)便，容易掌握。儀器操作簡(jiǎn)單，對(duì)樣品的預(yù)處理要求低，一般的粗提物即可進(jìn)行HSCCC的制備分離或分析。3、回收率高。HSCCC不需要固相載體，消除了由于樣品在固相載體上的不可逆吸附和降解造成的損失，理論上樣品的回收率可達(dá)100%。在實(shí)驗(yàn)中只要調(diào)整好分離條件，一般都有很高的回收率。4、重現(xiàn)性好，如果樣品不具有較強(qiáng)的表面活性作用，酸堿性也不強(qiáng)，即使多次進(jìn)樣，其分離過程都保持很穩(wěn)定，而且重現(xiàn)性相當(dāng)好。5、分離效率高，分離量較大。由于其與一般的色譜分離方式不同，能實(shí)現(xiàn)梯度洗脫和反相洗脫，亦能進(jìn)行重復(fù)進(jìn)樣，使其特別適用于制備性分離，產(chǎn)品純度高，制備量大。下一頁：確定樣品中含有蘆薈苷成分TLC定性檢測(cè)

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